Nuestro trabajo se enmarca en el estudio del proceso de exocitosis, y utilizamos como modelo experimental las células cromafines de la médula adrenal. Este proceso es disparado por un aumento del Ca2+ citosólico en un dominio próximo a la membrana plasmática, generada por activación de canales voltaje dependientes. El papel del Ca2+ en el proceso secretorio no parece limitarse a activar la fusión de los gránulos, ya que también participaría regulando otras etapas como la translocación entre diferentes “pools” vesiculares y la endocitosis. Las células neuroendocrinas poseen varias fuentes posibles de Ca2+: diferentes canales de Ca2+ (L, N, P/Q), y liberación de Ca2+ desde el retículo endoplasmático por receptores de rianodina y/o inositol trifosfato (IP3). En particular nos interesa estudiar la relación entre las señales de Ca2+ provistas por estas diferentes vías y los procesos de exocitosis, endocitosis y reciclado vesicular. Nos concentramos en dos aspectos: (1) el acoplamiento de subtipos de canales de Ca2+ con la exocitosis y la regulación del “pool” de vesículas inmediatamente liberable, y (2) el reciclado del pool liberable de vesículas y su relación con la vía endocítica utilizada. Se utilizan células cromafines en cultivo de ratón y vaca. Las técnica aplicadas son: (a) “Patch clamp” en configuración “whole cell” para la medición de corrientes y de la exocitosis por medio del registro de la capacitancia. (b) Para la medición de procesos de exocitosis masiva, endocitosis y reciclado vesicular se utiliza una técnica de microscopía de fluorescencia haciendo uso de indicadores fluorescentes que se unen a la membrana (tales como FM1-43, FM2-10) o solubles en agua (tales como dextranos rodaminados). (c) Las señales de Ca2+ que acompañan los procesos en estudio son registradas con el uso de indicadores de Ca2+ fluorescentes.